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2周快速鼠多抗制備佐劑-博特龍技術有限公司

詢盤留言 |投訴|申領|刪除 產品編號:478348619                    更新時間:2022-02-07
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1.  第21天按同樣方式加強免0疫1針。備注:每次佐劑和抗原現配現用。

2.  第35天采微量血進行ELISA測定,抗0體滴度應在1:10000-1:10000000范圍內,隨后即可采全血或按常規方法進行抗原沖擊免0疫和脾細胞融合。

3.  若抗0體滴度沒有達到要求,可在第42天按同樣方式加強免0疫1針。備注:通常情況下小鼠只需免0疫2針,而家兔往往需要免0疫3針。

4.  若免0疫3針,可在第52-56天采微量血進行ELISA測定,抗0體滴度應在1:10000-1:1000000范圍內,2周快速鼠多抗制備佐劑,隨后即可采全血或按常規方法進行抗原沖擊免0疫和脾細胞融合。備注:佐劑免0疫效果有時也與抗原特性有關,若免0疫3針后仍達不到要求,不建議進行更多針次免0疫。

使用方法    

1.  用生理鹽水將抗原稀釋到2倍zui終濃度(按小鼠每針次50μl、家兔每針次100μl用量配制)。備注:推薦使用的抗原用量為小鼠每針次10-20μg、家兔每針次20-50μg。

2.  用振蕩器充分混勻佐劑,無菌條件下取出所需用量(按小鼠每針次50μl、家兔每針次100μl)與抗原按體積比1:1混合,并用振蕩器劇烈振蕩5-10min,直至靜止放置10min水油相不分層。備注:與抗原混合前佐劑分層屬正?,F象,但必須充分混勻后才能取用。

3.  通過皮下或肌肉單點注射免0疫動物,小鼠每針次100μl,家兔每針次200μl。

(1)佐劑與抗原混合后應盡快注射,若放置時間較長出現水油相分層,則必須按上述步驟2重新振蕩混勻;

(2)抽入針管前應搖勻,抽入針管后應盡快注射;

(3)盡量選擇引流淋巴0結附近(如腋窩和腹0股0溝附近)的皮下或肌肉進行免0疫。

結 果

一、兩種免0疫方式小鼠血0清效價比較

對兩組試驗動物在完成了基礎免0疫后,尾靜脈采集少量血液,分離血0清,進行間接ELISA測定抗0體效價,檢測結果見圖1。由圖中數據可知,新的改良免0疫方法,在第二次免0疫后,抗0體效價即達到1:104。兩組數據經生物學統計軟件SPSS(Windows 13.0版)進行t檢驗,統計結果差異極顯著(P(0.001)。

二、兩種免0疫方式小鼠融合率比較

在細胞融合后約7~10 d可見孔內雜交瘤細胞生長,當細胞融合成片達孔底面積的35%~50%時,用ELISA檢測特異性抗0體。兩組免0疫小鼠細胞著。改良法耗費時間短,但獲得的抗0體效價更高。

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